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目的:构建2型猪链球菌假想转运蛋白89k/pTP的基因插入失活突变体并进行毒力相关分析。方法:首先将同源臂片段克隆到pSET4s质粒上,构建插入失活载体pSET4s-pTP,并通过对单交换的筛选获得89k/pTP的基因插入失活突变体,再用小鼠腹腔感染模型对突变株和野生株的毒力进行比较。结果:获得了89k/pTP的基因插入失活突变体,并发现其毒力与野生型相比明显下降。结论:2型猪链球菌假想转运蛋白89k/pTP与其毒力有关,其作用和机制值得进一步分析。 相似文献
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肉毒神经毒素(BoNT)是由肉毒梭菌产生的一类外毒素,它是目前自然界所发现的生物毒素中毒性最强的物质。近年来,BoNT制剂在临床治疗上呈现出广阔的应用前景。具有生物活性的BoNT由50kD的轻链(LC)和100kD的重链(HC)组成双链结构:LC具有锌内肽酶活性;HC为细胞结合和转位结构域。本文综述了BoNT的LC在一级结构、高级结构与功能的关系方面研究的新进展。 相似文献
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用SELEX技术筛选核酸适配子的原理及应用 总被引:1,自引:0,他引:1
SELEX技术是一项新的体外筛选技术,它是用体外合成的、库容为10^14-15左右的随机寡核苷酸库与靶物质结合,通过数轮的筛选与扩增,筛选到靶物质的目的的DNA或RNA片段,在疾病的诊断与治疗方面起着重要的作用,为核心酸的结构和功能的研究,提供了一个有效的方法。 相似文献
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采用PCR定点突变方法,成功地构建了抗HBsAg dsFv抗体的轻、重链突变基因,NdeI和EcoRI酶切后分别插入pET20b表达质粒,经测序证明在重链第44位氨基酸和轻链第100位氨基酸已突变形成半胱氨酸(Cys).VH和VL重组质粒分别转化到大肠肝菌BL21(DE3)中,IPTG诱导后,经SDS-PAGE电泳表明在12kD处有包含体蛋白表达,表达蛋白含量分别为28%和35%.VH和VL包含体蛋白经GuHCl变性后,等量混合在复性折叠液中结合,形成了一个约24kD并有一定活性的dsFv蛋白.抗HBsAg dsFv抗体表达及复性的成功,为今后基因工程抗体的研究及应用奠定了基础. 相似文献
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腺病毒(Ad)基因组E1,E3,以及E4区和右侧端插入性末端重复(IRT)之间的区段,均存在外源基因插入位点,本论述了外源保护性免疫原基因插入Ad基因组上述不同位点构建各类重组疫苗载体的研究进展。 相似文献
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利用DNA重组和细胞体内同源重组技术,分别获得了P7.5启动子和P11启动子单独带动的乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)基因的重组痘苗病毒和同一个重组痘苗病毒中含有P7.5和P11启动子分别带动一个HBsAg基因(正反两个插入方向)的四种重组痘苗病毒,比较了它们对HBsAg表达的影响。含P7.5启动子的比含P11启动子的重组痘苗病毒表达的HBsAg水平更高些;在同一个重组痘苗病毒中P7.5和P11两个启动子分别带动HBsAg基因时,两个启动子同向转录表达的HBsAg水平较低,而两个启动子又向转录时表达的HBsAg水平较高,但均没有单一P7.5启动子带动的HBsAg基因的表达水平高。 相似文献
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目的获得家兔二乙基亚硝胺诱发肝脏肿瘤的形态学资料,探讨Cmyc、p53基因和甲胎蛋白的表达情况。方法取5例家兔多结节肝癌的肿瘤性结节25个,瘤旁肝组织每例1块,进行一般病理组织学和超微结构观察。同时,以免疫组化方法检查Cmyc、p53基因和AFP的表达情况。结果和结论25个结节中,良性增生10个,高分化肝细胞癌11个,中分化肝细胞癌4个。家兔肝细胞癌的发生与Cmyc基因、AFP的过表达和p53基因的突变有关。参照肿瘤诱发过程中,增生性肝硬化、腺瘤样增生、高分化癌、中分化癌的变化顺序,在所检测的三种标志物中,Cmyc蛋白为最早出现的肿瘤标志物,p53基因突变相对较晚出现,AFP在恶性肿瘤结节中的表达率最高(933%)。 相似文献
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云南白草岭鼠形小兽群落结构及垂直分布 总被引:8,自引:1,他引:7
对云南白草岭鼠形小兽群落结构,垂直分布及动物区系进行了调查,结果共捕获小兽21种1028只,隶属于啮齿目(Rodenria)鼠科(Muridae)10种,仓鼠科(Cricetidae)2种,松鼠科(Sciuridae)2种;食虫目(Insectivora)Juqin科(Soricdae)6种,鼹科(Talpidae)1种。其中东洋界15种,占71.43%,古北界4种,占19.04%,广布种2种,占9.53%,各个垂直带鼠形小兽群落物种多样性指数分别为,Ⅰ,云南松林及山坡耕作地带(2000-2650m)1.3814;Ⅱ。温凉性针阔叶混交林带(2650-3150m)1.6126;Ⅲ.苍山冷杉林带(3150-3500m)1.3488;Ⅳ。亚高山灌丛草甸带(3500-3657m)1.5085。云南白草岭优势种主要由齐氏姬鼠(Aopdemus chevieri)、中华姬鼠(A.draco)、大耳姬鼠(A.latronum)、大绒鼠(Eothenomys miletus)和昭通绒鼠(E.olitor)5种组成。 相似文献